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CJI (Traditional Chinese Medicine) - - 中国中医药信息杂志 -

Spectramax i3 (Molecular Devices 公司),AE240

天平(梅特勒-托利多仪器有限公司),SK3300L

清洗仪器(上海精密仪器仪表有限公司),RE-3000A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),BHZ-D(Ⅲ)

循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司),HH-4电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司),

AFX20501-P 超纯水机(重庆艾科浦外贸颐洋企业发

展有限公司),800型离心机(上海手术器械厂)。柳茶药材购于甘肃省甘南藏族自治州合作市郊(海拔 3200 m以上),经兰州大学药学院生药学研究所杨永建教授鉴定其为蔷薇科 Rosaceae 鲜卑花属植物窄叶鲜卑花 Sibiraea angustata(Rehd.)Hand-Mazz.的叶。乙酰唑胺原料药(武汉远城科技发展有限公司,批号 100114,纯度≥98%),熊果酸对照品(北京索莱宝科技有限公司,批号 20161213,纯度≥98%);

HPD500、AB-8、DA201、D101、LX-60 大孔吸附树脂(北京索莱宝科技有限公司)。乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯。

清洁级 BABL/C 雄性小鼠,体质量(20±2)g,

5 周龄,兰州军区陆军总医院动物实验科提供,动物许可证号 SYXK(军)2014-0029。动物自由摄食饮水。饲养室保持良好通风,控制环境温度 24~26 ℃、相对湿度 50%~60%,12 h循环光照。

所有数据均采用 SPSS20.0 统计软件进行分析。

2.3小鼠常压密闭缺氧实验筛选提取溶剂称取柳茶药材25 g,分别加入水、70%乙醇、80%

乙醇、95%乙醇提取,提取温度为 80 ℃,每次提取

2 h,提取 2次,合并提取液。减压浓缩后挥发去溶剂,采用真空冷冻干燥制成细粉待用。将小鼠随机分成缺

氧模型组、水提取物组、70%乙醇提取物组、80%乙醇提取物组和95%乙醇提取物组,各给药组灌胃剂量为 500 mg/kg(药液浓度 10 mg/mL,灌胃体积 1 mL),缺氧模型组给予等量生理盐水,各组均灌胃 5 d。最后一次给药后60 min,将各组小鼠放入 250 mL 广口瓶(瓶中事先放入5g碱石灰,用于吸收二氧化碳与水分,并且在瓶底放入适量滤纸吸取尿液与粪便),在瓶口涂抹凡士林进行密闭,随后开始计时,当小鼠呼吸停止时结束计时,记录小鼠在密闭实验瓶中的存

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