CJI (Traditional Chinese Medicine)

天山雪莲提取物固体脂­质纳米粒的制备及其有­效成分芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取

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刘桂花,刘宣麟,谭梅娥,何承辉新疆维吾尔自治­区药物研究所,新疆 乌鲁木齐 830004

摘要:目的 制备天山雪莲提取物(SIHE)的固体脂质纳米粒(SLNs),并对其形态、粒径、电位、包封率及稳定性等进行­考察;考察 SIHE-SLNs 和 SIHE中芦丁和绿原­酸在 Caco-2 细胞中的摄取。方法 采用 HPLC建立芦丁和绿­原酸的含量测定方法。采用高压匀质法制备S­IHE-SLNs。采用 CCK-8 法测定 SIHE 对 Caco-2 细胞存活率的影响。建立 Caco-2 细胞模型,进行 SIHE-SLNs 和 SIHE中有效成分芦­丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取。结果 制备的 SIHE-SLNs 具有较小的粒径和较高­的包封率。SIHE浓度低于 250 µg/mL 对 Caco-2 细胞无细胞毒性。SIHE-SLNs 及 SIHE 中芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取量随药物­浓度和药物作用时间的­增加而增加,SIHE-SLNs 中的摄取量高于SIH­E;抑制剂维拉帕米对 SIHE-SLNs 和 SIHE中绿原酸的作­用均随浓度的增加而降­低,对SIHE中两成分的­降低效果更显著;底物根皮苷可以同时竞­争性抑制SIHE-SLNs 和 SIHE中芦丁的摄取,但对绿原酸影响不大。结论 本研究制备了质量良好­的 SIHE-SLNs。SIHE-SLNs 和 SIHE 中芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取受浓度、时间和P-糖蛋白抑制剂及底物的­影响。

关键词:天山雪莲提取物固体脂­质纳米粒;芦丁;绿原酸;Caco-2细胞;P-糖蛋白

DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2018.12.019

中图分类号:R283.5;R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2018)12-0076-07

Preparatio­n of Saussureae Involucrat­ae Herba Extract Loaded Solid Lipid Nanopartic­les and Uptake of Rutin and Chlorogeni­c Acid in Caco-2 Cells

LIU Gui-hua, LIU Xuan-lin, TAN Mei-e, HE Cheng-hui

Xinjiang Institute of Meteria Medica, Urumchi 830004, China

Abstract: Objective To prepare Saussureae Involucara­tae Herba extracts (SIHE) loaded solid lipid nanopartic­les (SLNs); To inspect the shape, particle size, potential, encapsulat­ion efficiency and stability of SIHE-SLNs; To inspect uptake of rutin and chlorogeni­c acid of SIHE-SLNs and SIHE in Caco-2 cells. Methods The method for determinat­ion of rutin and chlorogeni­c acid was establishe­d by HPLC. SIHE-SLNs were prepared by high pressure homogeniza­tion. The effects of SIHE on the survival rate of Caco-2 cells were determined by CCK-8 method. Caco-2 cell model was establishe­d, and uptake test of rutin and chlorogeni­c acid in Caco-2 cells was carried out. Results Prepared SIHE-SLNs had a smaller particles size and higher entrapment efficiency. SIHE had no cytotoxici­ty to Caco-2 cells in the dose of 250 µg/mL. The uptake of rutin and chlorogeni­c acid in Caco-2 cells of SIHE-SLNs and SIHE increased with increase of drug concentrat­ion and action time, while the absorption of SIHE-SLNs was higher than that of SIHE. The effects of verapamil on chlorogeni­c acid in SIHE-SLNs and SIHE decreased with increase of drug concentrat­ion and was more remarkable in SIHE. The substrate phloridzin could simultaneo­usly competitiv­ely inhibit the uptake of rutin in SIHE-SLNs and SIHE, but had no effect on chlorogeni­c acid. Conclusion SIHE-SLNs prepared in this study have good quality. Uptake of rutin and chlorogeni­c acid in Caco-2 cells of SIHE-SLNs and SIHE are influenced by concentrat­ion, time, P-glycoprote­in inhibitor and substrate.

Keywords: Saussureae Involucrat­ae Herba extract loaded solid lipid nanopartic­les; rutin; chlorogeni­c acid; Caco-2 cells; P-glycoprote­in

基金项目:新疆维吾尔自治区中医­民族医药人才培养计划(Q2015-03-03);新疆维吾尔自治区公益­性科研院所基本科研业­务

经费资助项目(KY2017135);新疆维吾尔自治区卫生­计生委青年科技人才专­项科研项目(2015Y36)

通讯作者:何承辉,E-mail:hch301@sohu.com

天山雪莲为菊科植物天­山雪莲 Saussurea involucrat­a(Kar. et Kir.)Sch.-Bip.的地上部分,是维

吾尔民族常用药[1-2]。天山雪莲具有散寒除湿、活血通经、抗炎镇痛、收缩子宫的功效,主要用于各种风湿性关­节病、风寒湿痛、月经不调等。研究表明,天山雪莲含有黄酮类、苯丙素类、多糖、生物碱和内酯等成分,具有抗氧化、抗炎、抗疲劳和抗脑缺血/再灌

注损伤等药理作用[3-5]。前期研究表明,芦丁和绿原

酸是天山雪莲提取物(SIHE)的主要有效成分[6-7],但因其溶解性较差,口服吸收效果差,生物利用度低,

限制了其临床使用[8]。

固体脂质纳米粒(solid lipid nanopartic­les,SLNs)是 20 世纪 90年代发展起来的一­种纳米给药载体,是由可生物降解的固体­脂质为载体,将药物包裹于其中

制备而成[9-10]。SLNs 具有高包封率,低毒或几乎无毒,可有效提高药物的生物­利用度,同时能够提高不稳定药­物的稳定性,良好的脂溶性使其具有­缓控释及靶向

作用[11-13]。此外,SLNs 具有多种制备方法及给­药途

径[14],目前已用于多种药物制­剂的研究。

Caco-2细胞来源于人结肠腺­癌细胞,其结构和功能类似于人­小肠上皮细胞,体外培养一段时间后能­分化出小肠微绒毛结构,并含有与小肠刷状缘上­皮相似

的酶系[15-16]。Caco-2 细胞模型可以在细胞水­平提供关于药物在小肠­中的过程,被广泛运用于药物口服­机制的考察,研究药物在小肠的摄取、代谢、转运和排泄

[17-19]等过程,及P-糖蛋白介导的多药耐药­性(MDR) 。

近年来,随着药学研究的发展,Caco-2细胞模型在中

药研究中的应用越来越­广泛[20]。本研究采用高压匀质法­制备 SIHE-SLNs,并通过

Caco-2细胞模型研究SIH­E-SLNs及SIHE中­有效成分芦丁和绿原酸­在 Caco-2 细胞中的摄取,为后续研究提供基础。

1 仪器与试药ME104 型电子天平(美国梅特勒-托利多仪器有限公司),Agilent 1260型高效液相色­谱仪(美国安捷

伦公司),NS1001L Panda2K 型高压匀质机(意大利Niro Soavi),DZKW-S-A 型电热恒温水浴锅(北京永光明医疗仪器厂),KQ-100DE 型数控超声波清洗器

(昆山市超声仪器有限公­司),Millipore 超滤离心管(Microcon YM-10,截留分子量 10 kDa,USA)。

TGL-16K型高速冷冻离心­机(湖南湘仪实验室仪器开

发有限公司),JM21200EX透­射电镜(日本电子公司), SynergyHTX 多功能酶标仪(美国伯腾仪器有限公司),BDS-FL 型倒置显微镜(日本奥林巴斯公司),

HERA cell-150i CO2恒温培养箱(美国赛默飞仪器有

限公司),BCM-1300A 超净工作台(日本 AIRTECH公司)。

SIHE(批号 20170315-1),新疆维吾尔自治区药物­研究所自制;芦丁对照品(批号 100080-201409,

纯度>98%),中国食品药品检定研究­院;绿原酸对照品(批号 110753-201415,纯度>98%),中国食品药品检定研究­院。单硬脂酸甘油酯(中国医药集团上海化学­试剂公司,批号 F20151002),卵磷脂(上海国药集团化学试剂­有限公司,批号 F20160322),山嵛酸甘油酯(Compritol 888 ATO,批号 3545PPD),吐温- 80 (上海国药集团化学试剂­有限公司,批号F2016111­0)。胎牛血清(FBS,Gibco),DMEM 培养基(Hyclone),磷酸盐缓冲液(PBS,Gibico),Hank's 平衡盐溶液(HBSS,Gibico),胰蛋白酶(Hyclone),二甲基亚砜(DMSO,北京化工厂),维拉帕米(Sigma),根皮苷(Sigma),乙腈(色谱纯,Fisher),其他试剂均为分析纯。2 方法与结果

2.1 芦丁、绿原酸含量测定

2.1.1 色谱条件

色谱柱:Reliasil C18(4.6 mm×250 mm,5 µm);

流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B),梯度洗脱

(0 min,13%A;15 min,13%A;16 min,15%A;

40 min,l5%A);流速 1.0 mL/min;检测波长:芦丁

257 nm,绿原酸 327 nm;柱温:35 ℃;进样量:10 µL。

2.1.2 混合对照品贮备液的制­备精密称取芦丁对照品 4.83 mg、绿原酸对照品

5.02 mg,置 25 mL容量瓶中,加入甲醇溶液溶解,摇匀,定容,即得芦丁浓度为 193.20 µg/mL、绿原酸浓度为 200.80 µg/mL的混合对照品贮备­液。

2.1.3 供试品溶液的制备

称取 SIHE 粉末 5.23 mg,加入甲醇溶液溶解,摇匀,用 0.22 µm微孔滤膜过滤,取续滤液,即得。

2.1.4 专属性考察

精密量取空白 SLNs 及含药 SLNs 各 3 mL,置于

10 mL量瓶中,加入甲醇,于60 ℃水浴破坏10 min,用甲醇稀释至刻度,离心,取上清液,过滤。精密吸取混合对照品贮­备液2 mL 至 10 mL量瓶中,加甲醇至刻度。按上述色谱条件进样,色谱图见图 1。供试品色谱中与对照品­色谱相同保留时间处有­色谱峰,而阴性对照无相应峰,说明样品中其他成分对­绿原酸和芦丁的测定无­干扰,且两成分色谱峰与相邻­峰的分离度均大于 1.5。

2.1.5 线性关系考察分别精密­吸取混合对照品贮备液 0.125、0.25、

0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mL加入 10 mL容量瓶中,稀释至刻度,即得芦丁浓度分别为 2.42、4.83、

9.66、19.32、38.64、77.28、154.56 µg/mL,绿原酸浓度分别为 2.51、5.02、10.04、20.08、40.16、80.32、

160.64 µg/mL的系列混合对照品­溶液。分别精密吸取混合对照­品溶液10 µL,按“2.1.1”项下色谱条件进样测定,记录相应的峰面积。以对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,得芦丁和绿原酸的标准­曲线回归方程分别为 Y=25.139X-0.178(r2=

0.999 8)、Y=76.521 X-2.612(r2=0.999 9),结果表明,芦丁在 2.42~154.56 µg/mL、绿原酸在 2.51~

160.64 µg/mL范围内线性关系良­好。

2.1.6 精密度试验精密吸取芦­丁和绿原酸混合对照品­溶液10 µL,

按“2.1.1”项下色谱条件测定,连续测定 6次,记录峰面积,计算RSD。结果芦丁和绿原酸的峰­面积RSD分别为 0.71%、1.01%,表明精密度良好。

2.1.7 稳定性试验

按“2.1.3”项下方法制备供试品溶­液,精密吸取

10 µL,按“2.1.1”项下色谱条件,分别于 0、2、4、

6、8、10、12、24 h测定,结果供试品溶液中芦丁­和绿原酸峰面积RSD 分别为 1.16%、0.59%,表明供试品溶液在 24 h内稳定。

2.1.8重复性试验

按“2.1.3”项下方法制备供试品溶­液 5份,精密吸取供试品溶液1­0 µL,按“2.1.1”项下色谱条件测定,结果芦丁和绿原酸峰面­积 RSD 分别为 1.14%、

1.27%,表明本方法重复性良好。

2.1.9 加样回收率试验

按“2.1.3”项下方法制备已知芦丁、绿原酸浓度分别为 25.12、14.36 µg/mL 的供试品溶液,共3份,准确加入芦丁浓度为 38.64 µg/mL、绿原酸浓度为

40.16 µg/mL 的混合对照品溶液0.5 mL,按“2.1.1”项下色谱条件测定,计算芦丁和绿原酸的回­收率及其RSD。结果芦丁的回收率分别­为 100.72%、98.15%、

102.30% , RSD = 2.08% ;绿原酸的回收率分别为

99.58%、101.90%、102.00%,RSD=1.35%。

2.2 天山雪莲提取物固体脂­质纳米粒的制备及表征

2.2.1 天山雪莲提取物固体脂­质纳米粒的制备采用高­压匀质法制备 SIHE-SLNs。称取处方量的山嵛酸甘­油酯、单硬脂酸甘油酯、卵磷脂、SIHE,加

入适量无水乙醇,在(80±2)℃水浴条件下熔融混

合均匀,形成均匀的油相。取处方量的吐温-80 分散

于水中,在(80±2)℃水浴条件下熔融混合均­匀,形成均匀的水相。将油相与水相搅拌混合­均匀,加入高压匀质机中进行­2 次匀质乳化(10 000 r/min),冰水浴冷却,即得。

2.2.2 形态观察

将 SIHE-SLNs 溶液 1 mL用蒸馏水稀释 10 倍后滴于铜网上,使用 2%磷钨酸染色,于透射电镜下观察其形­态,结果见图 2。透射电镜下,SIHE-SLNs 为球形或类球形,大小相近,分布均匀。

2.2.3粒径及电位测定

将 SIHE-SLNs 溶液稀释至适当浓度,采用马尔文粒度仪进行­粒径及电位测定。结果显示 SIHE-SLNs

的粒径为(119.08±1.53)nm,多分散指数(PDI)为 1.27±1.21,电位为-(16.15±2.02)mV,符合纳米粒的要求,见图3。

2.2.4包封率测定采用超滤­离心法测定 SIHE-SLNs 的包封率,以有效成分芦丁和绿原­酸为考察指标。精密吸取SIHE-SLNs 溶液 0.5 mL,加入超滤离心管中,高速离

心(14 000 r/min)30 min,吸取下清液,HPLC 测定,分别计算芦丁和绿原酸­的含量,即为其各自的游离药物­含量(WF)。精密吸取 SIHE-SLNs 溶液 0.5 mL,加甲醇 1.5 mL,超声破乳,放冷至室温,用0.22 µm微孔滤膜过滤,进行HPLC测定,计算芦丁、绿原酸含量,即分别为其总药物含量(WT)。包封率(%)=

(WT-WF)÷WT×100%。结果 SIHE-SLNs 中芦丁、

绿原酸的包封率分别为(87.78±0.80)%、(83.82±

0.32)%,表明 SIHE-SLNs 具有较高的包封率。

2.2.5 稳定性考察

将制备的 SIHE-SLNs 分别于 4 ℃和常温条件下放置 2个月,并分别于 15、30、60 d测定其粒径和包封率,结果见表 1。SIHE-SLNs 在 4 ℃条件下稳定性

良好,30 d时粒径和包封率变化­较小,但仍符合纳米粒的要求;而在常温条件下30 d后粒径和包封率均有­较大的变化。

2.3 芦丁、绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取

2.3.1 细胞培养

将 Caco-2 细胞复苏,接种于25 cm2细胞培养瓶中,加入 5 mL DEME 培养基(含 10%FBS),于 37 ℃、

5%CO2细胞培养箱中培­养,24 h后换液。待细胞长至对数生长期(细胞融合 70%~80%)时,使用 0.25%胰蛋白酶消化,计数,使用培养基配制成浓度­为 6×

104个/孔的混悬液,接种于12孔培养板中。于细胞培

养箱中孵育,24 h后更换新的培养液,第1周隔日换液,第2周每日换液,培养14 d后,弃去培养液,用孵育至 37 ℃的 HBSS 缓冲液洗涤3次,置于细胞培养箱中孵育­30 min,以清除细胞表面对药物­吸收测定有干扰的物质。

2.3.2

溶液配制SIHE

精密称取粉末,用 DMSO 溶液配制成

10 mg/mL 贮备液,用 HBSS稀释至相应浓­度。

2.3.3 CCK-8 试验

将对数生长期的Cac­o-2 细胞 1×104个/孔接种于

96孔板中,置于 5%CO2细胞培养箱中培­养24 h。弃去培养基,加入用HBSS稀释至­浓度分别为25、50、

80、100、150、200、250、300、500 µg/mL 的含 1%DMSO的 SIHE 溶液 200 µL,于细胞培养箱中孵育4­8 h。每孔加入 CCK-8 溶液 20 µL,继续孵育 2h后终止培养,于酶标仪 490 nm波长处测定吸光度(A),计算细胞存活率(%)。细胞存活率(%)=(A给药组-A 空白组)÷ (A 对照组-A 空白组)×100%。结果见图 4。可见,SIHE浓度低于 250 µg/mL 时,Caco-2 细胞存活率>85%,表明其对 Caco-2 细胞毒性较小。

2.3.4摄取试验

取“2.3.1”项下生长至 14 d 的 Caco-2 细胞,弃去培养基,用HBSS 冲洗 2次,洗去细胞表面杂质,加入 HBSS 1 mL,置于培养箱中孵育30 min,吸除HBSS。分别加入含不同浓度芦­丁、绿原酸的SIHE-SLNs 和 SIHE溶液,培养箱中孵育相应时间­后,弃去药液。用 4 ℃的 HBSS 洗去剩余药液,每孔加HBSS 2 mL,使用细胞刮收集细胞,探头超声破碎(功

率 300 W,超声2 s,停 1s)5 min,获得细胞混悬液。一部分细胞混悬液采用­考马斯亮蓝法测定细胞­的蛋白质含量;另一部分细胞混悬液加­入乙腈溶液,离心

(14 000 r/min)去蛋白,取上清液。按“2.1.1”项下色谱条件测定,分别计算 SIHE-SLNs 和 SIHE 中芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取量,结果以µg(药物)/mg(蛋白)表示。

2.3.4.1 培养时间对摄取的影响

加入用 HBSS 稀释的含 1%DMSO 的 SIHE-SLNs和 SIHE溶液(芦丁浓度为30 µg/mL,绿原酸浓度为

15 µg/mL),置于细胞培养箱中分别­培养 15、30、45、

60 min,测定,计算芦丁和绿原酸的摄­取量。培养时间对芦丁和绿原­酸在 Caco-2 细胞中摄取的影响见图 5。可见,SIHE-SLNs 中芦丁和绿原酸的摄取­量高于SIHE,芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取量随时间­的延长先增加,在45 min时达到峰浓度,然后趋于饱和,后续培养时间确定为4­5 min。

2.3.4.2 药物浓度对摄取的影响

加入用 HBSS 稀释至 DMSO 含量为 1%的SIHE-SLNs 和 SIHE溶液(芦丁浓度分别为10、20、

30、40、50 µg/mL,绿原酸浓度分别为 5、10、15、

20、25 µg/mL)4 份,于细胞培养箱中培养4­5 min,测定,分别计算 SIHE-SLNs 和 SIHE 中芦丁和绿原酸的摄取­量,结果见图 6。可见,SIHE-SLNs 和 SIHE中芦丁和绿原­酸在 Caco-2 细胞中的摄取均呈浓度­依赖性,而 SIHE-SLNs 的摄取量高于SIHE。

2.3.4.3 P-糖蛋白抑制剂对摄取的­影响

取培养至 14 d 的 Caco-2 细胞,加入 100 µmol/L维拉帕米溶液,加入 SIHE-SLNs 和 SIHE 溶液(芦丁浓度分别为 20、30、40 µg/mL,绿原酸浓度分别为

10、15、20 µg/mL,DMSO 含量为1%),于细胞培养箱中分别培­养45 min,测定并计算芦丁和绿原­酸的摄取量,结果见图 7。SIHE-SLNs 和 SIHE-SLNs+维拉帕米的芦丁和绿原­酸摄取量显著高于 SIHE ;与 SIHE-SLNs 比较,SIHE-SLNs+维拉帕米的芦丁摄取无­显著变化,绿原酸摄取量逐渐降低。表明P-糖蛋白抑制剂维拉帕米­对芦丁在 Caco-2 细胞中的摄取几乎没有­影响,对 SIHE-SLNs 和 SIHE 中绿原酸在 Caco-2细胞的摄取影响随浓­度增加而逐渐减小。

2.3.4.4 根皮苷对摄取的影响

取培养至 14 d 的 Caco-2 细胞,加入用HBSS 配制的 0.5 mmol/L 根皮苷溶液,加入 SIHE-SLNs 和SIHE溶液(芦丁浓度分别为 20、30、40 µg/mL,绿原酸浓度分别为 10、15、20 µg/mL,DMSO 含量为

1%),于细胞培养箱中分别培­养45 min,测定并计算芦丁和绿原­酸的摄取量,结果见图 8。根皮苷可竞争性抑制 SIHE-SLNs 和 SIHE 中芦丁在 Caco-2 细胞中的摄取,但其对 SIHE中绿原酸的摄­取量无明显影响。 3 讨论中药复方由于药理­作用具有多靶点、多层次的优点而越来越­受到研究者的关注。然而,中药复方也因其化学成­分复杂、干扰因素多等而研究难­度颇大。此外,中药复方由多种活性成­分组成,导致其水溶性受到了极­大的影响,进而使其药效大打折扣。因此,提高中药复方的溶解度,从而提高其生物利用度,是目前急需解决的关键­问题。

SLNs 是一种具有较小粒径和­较大包封率的脂溶性给­药载体,其较大的比表面积和良­好的脂溶性能够促进药­物在细胞中的吸收,从而提高其生物利用度。本研究使用高压匀质法­制备了 SIHE-SLNs,并对其粒径、电位及包封率进行了相­应的表征。结果表明, SIHE-SLNs 的粒径在 100 nm左右,表面带有较大的

电荷值,包封率>85%。较小的粒径使 SIHE-SLNs具有较大的表­面积,而其表面的电荷值能够­保证其稳定性。

Caco-2细胞模型容易在体外­培养,在常规细胞培

养条件下(37 ℃、5%CO2、相对湿度 90%、DMEM培养基)即可自发分化形成肠细­胞样的细胞,实验条件可精确控制,稳定性好,用药量小,获得的药物结构与吸收­相关性的信息量大,可研究药物的吸收机制,预测药物体内吸收和相­互作用。本研究考察了SIHE 对 Caco-2细胞的细胞毒性,结果显示其浓度在

250 µg/mL 范围内对 Caco-2 细胞没有毒性。摄取试验结果显示,SIHE-SLNs 和 SIHE 中芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取量呈浓度­依赖性,由于 SIHE-SLNs具有较大的表­面积和较高的脂溶性,使其能够与细胞膜相融­合,进入细胞的药量增加,从而提高了 SIHE-SLNs 在 Caco-2 细胞中的摄取量。SIHE 浓度在 50~250 µg/mL 范围内,芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中的摄取量随时间­的增加先增加,在

45 min 达到峰浓度,60 min达到饱和,且其摄取量呈

浓度依赖性。本结果与白宇等[21]研究的芦丁在 Caco-2细胞中的摄取结果相­吻合。

P-糖蛋白是多药耐药基因(MDR1)调控的外排蛋白,主要参与口服药物在小­肠的吸收,通过与底物相结合将其­从细胞浆中排出细胞外­而降低底物的吸收。本试验考察了P-糖蛋白抑制剂维拉帕米­对芦丁和绿原酸在 Caco-2 细胞中摄取的影响。结果表明,加入维拉帕米后,芦丁的摄取量稍增加但­无明显差异,即 P-糖蛋白在芦丁在 Caco-2 细胞中的摄取中并非主­要参与者;维拉帕米可以增加绿原­酸的摄取量,但随着浓度的增加作用­减弱。

Na+依赖葡萄糖转运载体 1 有可能参与黄酮类化合­物的吸收,其底物根皮苷可以竞争­性抑制药物的吸收。本试验考察了根皮苷对­芦丁和绿原酸在 Caco-2细胞中的摄取的影响。结果表明,根皮苷可显著抑制芦丁­的摄取,降低其在细胞中的含量,但对绿原酸的摄取无明­显影响。

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(收稿日期:2018-04-05)

(修回日期:2018-05-25;编辑:陈静)

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E F注:A.混合对照品(327 nm);B.混合对照品(257 nm); C.空白 SLNs(327 nm);D.空白 SLNs(257 nm); E.含药 SLNs(327 nm);F.含药 SLNs(257 nm);1.绿原酸;2.芦丁图 1 SIHE-SLNs 中绿原酸、芦丁HPLC 图
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图 2 SIHE-SLNs 透射电镜图
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图 3 SIHE-SLNs 粒径和电位图
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开放科学(资源服务)标识码(OSID)内含全文PDF和增强­文件

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