蒙医不同针刺法对慢性应激抑郁大鼠额叶神经元形态及 NO-cGMP信号通路的影响

赛音朝克图1，赵贤芳 2，那顺 2，景泉凯 3，陈福玉 1，黄金刚 1

1.内蒙古自治区国际蒙医医院，内蒙古 呼和浩特 010065；

2.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028000；

3.北京中医药大学针灸推拿学院，北京 100029

摘要：目的 观察蒙医不同针刺法对抑郁模型大鼠额叶神经元及NO-cGMP信号通路的影响，探讨蒙医不同针刺法抗抑郁作用的生物学机制。方法 雄性 SD大鼠随机分为正常组、模型组、百忧解组、蒙医银针组、蒙医三根平衡针组、针药结合组，每组8只。除正常组外，其余各组大鼠孤养，不可预知的应激刺激前1 h，

接受不同方式的治疗。28 d后观察大鼠行为学改变，断头取大鼠海马及额叶组织，不同染色观察额叶神经元形态改变，应用硝酸还原酶法和放射免疫法检测海马及额叶NO-cGMP 含量。结果 尼氏染色结果显示，模型组大鼠额叶神经元锥体细胞形态不完整、排列紊乱、数量明显减少，尼氏体变浅、大部分模糊不清；蒙医三根平衡针组、蒙医银针组大鼠额叶神经元形态尚可，尼氏体呈深蓝色。HE染色结果显示，模型组大鼠额叶神经元胞膜破裂、结构不清楚，部分细胞脱落而形成空泡；蒙医三根平衡针组、蒙医银针组大鼠额叶细胞排列较规则，细胞层次较丰富，神经元胞膜较完整。与正常组比较，模型组额叶及海马NO-cGMP含量明显升高，各治疗组均能不同程度逆转此变化。结论 蒙医不同针刺法可能通过调控NO-cGMP的表达而达到治疗抑郁症的目的。关键词：抑郁症；额叶；神经元；NO-cGMP信号通路；蒙医针刺；大鼠

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.04.011

中图分类号：R245 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2017)04-0040-05

Effects of Different Mongolian Acupuncture Methods on Neurons Form in Frontal Lobe and NO-cGMP Signaling Pathways in Rats with Chronic Stress Depression

SAI Yinchaoketu1, ZHAO Xian-fang2, NA Shun2, JING Quan-kai3, CHEN Fu-yu1, HUANG Jin-gang1 (1. Inner Mongolia International Mongolian Hospital, Hohhot 010065, China; 2. Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao 028000, China; 3. School of Acupuncture-moxibustion and Tuina, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China)

Abstract: Objective To observe the effects of different Mongolian acupuncture methods on neurons form in frontal lobe and NO-cGMP signaling pathways in rats with chronic stress depression; To explore biological mechanism of different Mongolian acupuncture methods for depression. Methods The male SD rats were randomly divided into control group, model group, fluoxetine group, Mongolian silver acupuncture group, Mongolian acupuncture “three modulation methods” group, and the combination of acupuncture with fluoxetine group (8 rats in each group). Except for control group, other rats were kept alone. Rats receive different treatment 1 hour before stimulations. Behavior changes were observed after 28 days. Hippocampus and frontal lobe tissues were collected. Frontal lobe neurons form changes were observed through different dyeing methods. The content of NO-cGMP was detected by radioimmunoassay and nitrate reductase method. Results Results of Nissl's staining showed that the neuronal pyramidal cells in the frontal lobe of model group rats arranged disorderedly, morphology was not intact and the number was obviously reduced. Nissl's staining got shallow and the most were blurry. The form of the frontal lobe 基金项目：国家自然科学基金（81360576）；内蒙古自治区自然科学基金（2015MS08130）

皮吸收，直达病所。

穴位处方中脾俞为脾脏精气输注之处，有健脾益气之功；中脘位于腹部，有疏利气机之能；足三里既能生发胃气、燥化脾湿，又能通腑导滞、清热利湿，《四总穴歌》曰：“肚腹三里留”；大肠俞有调和肠胃、活血定痛之力；天枢为大肠经募穴，有调理肠腑、理气行滞之能；上巨虚为大肠经之下合穴，有调理肠腑、清热化湿之功。诸穴合用，扶正祛邪并举，既健脾补中以治本，又化湿、清热、祛瘀以治标，使肠腑气血调和，诸症得除。《本草从新》载艾叶“能通十二经，走三阴，理气血，逐寒湿……以之灸火，能透诸经而除百病”，指出艾灸具有较好的温通经络、调气和血、散寒除湿作用。研究表明，艾灸可以降低UC大鼠结肠及下丘脑辣椒素受体1的表达，使其诱导感觉神经元产生的兴奋性减弱，进而减轻肠道痉挛，缓解症

状[8]。隔药饼灸通过穴位刺激、温热刺激及药物作用等途径达到调节胃肠功能、缓解胃肠道痉挛的目的。临床研究指出，隔药饼灸对UC 有较好的临床疗效[9-10]。本研究结果表明，观察组总有效率为 93.33%，优于对照组的 76.67%，且治疗后观察组主要症状腹泻、腹痛、脓血便评分及总分的改善优于对照组，差异有

统计学意义（P＜0.05）。当前，内镜下肠道黏膜愈合是治疗UC的目标之一。研究指出，黏膜愈合在复发率、癌变风险及手术率方面明显低于黏膜未愈合者，且黏膜愈合者的生活

质量高于黏膜未愈合者[11-12]。临床上常用的内镜评分指标较多，但大同小异，其中以Baron 评分的应用最

为广泛。本研究表明，2组均能降低 Baron 评分，观

察组改变更为显著（P＜0.05），提示隔药饼灸能促进UC 患者肠道黏膜愈合，改善疾病预后，提高患者生活质量。趋化因子是一种能够吸引白细胞移行到感染部位的低分子蛋白质，在炎症反应中起重要作用。

CCL20作为趋化因子的一员，能与CC趋化因子受体6

（CCR6）识别、结合，将树突状细胞、T 细胞、B细胞等引导至肠黏膜。Skovdahl H K 等[13]研究表明， UC活动期时，CCL20及 CCR6 mRNA表达明显增高；

张健等[14]研究指出，UC 患者外周血 CCL20 蛋白表达水平增高，且与疾病严重程度呈正相关，UC 病情分级越重，外周血 CCL20 蛋白表达水平越高。上述研究提示，血清 CCL20 参与了 UC 的发病，其机制可 能是通过趋化CCR6细胞浸润肠道黏膜，进而引发肠道炎症，导致UC发生。本研究表明，治疗后2 组血清 CCL20 蛋白表达水平下降，观察组较对照组下降更明显，提示隔药饼灸可能通过调节血清 CCL20 蛋白表达水平，抑制肠道炎症反应，从而达到治疗 UC的目的。

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（收稿日期：2016-08-30）

（修回日期：2016-09-21；编辑：季巍巍）