不同压敏胶基质对小儿清热宣肺贴释药速率和透皮吸收的影响

肖文，刘晓霞，王继龙，魏舒畅，蒲红利，周博

甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000

摘要：目的 考察不同压敏胶基质对小儿清热宣肺贴中有效成分释放速率和微透析累积透过率的影响，测定其释药和透皮性能，为小儿清热宣肺贴优选出最适宜的基质。方法 采用 HPLC 测定 0.5～8h 苦杏仁苷的累积溶出量和给药8 h苦杏仁苷微透析累积透过量，比较不同压敏胶基质对小儿清热宣肺贴中有效成分释放速率和透皮吸收的影响。结果 小儿清热宣肺凝胶基质贴溶出8 h时苦杏仁苷基本完全释放，中分子量聚异丁烯基质贴溶出8 h时苦杏仁苷溶出度约为10%，高分子量聚异丁烯基质贴在此时间段内未检测到苦杏仁苷的释放。凝胶基质贴给药8h苦杏仁苷微透析累积透过量为（29.13±3.09）%，中分子量聚异丁烯基质贴在此时间段内微透析累积透过量为0。结论 水凝胶基质有利于药物有效成分的释放和透皮吸收，更适合用作小儿清热宣肺贴的基质。

关键词：小儿清热宣肺贴；基质；微透析；释放速度；透皮吸收；苦杏仁苷

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.08.019

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2018)08-0086-04

Effects of Different Kinds of Pressure-Sensitive Adhesive Matrix on Release Rate of Effective Components and Transdermal Absorption of Pediatric Qingre Xuanfei Plaster

XIAO Wen, LIU Xiao-xia, WANG Ji-long, WEI Shu-chang, PU Hong-li, ZHOU Bo

Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China

Abstract: Objective To investigate the effects of different kinds of pressure-sensitive adhesive matrix on release rate of effective components and the cumulative transmittance of microdialysis on pediatric Qingre Xuanfei Plaster; To measure the release and penetration properties; To choose a suitable substrate for pediatric Qingre Xuanfei Plaster. Methods HPLC method was used for determine 0.5–8 h laetrile cumulative dissolution amount and 8 h laetrile cumulative transmittance amount of microdialysis. Effects of different kinds of pressure sensitive adhesive matrixs on release rate of effective components and transdermal absorption on pediatric Qingre Xuanfei Plaster were compared. Results When pediatric Qingre Xuanfei Plaster of hydrogel matrix was dissoluting in 8 h, the laetrile was almost released in full; when plaster of the medium molecular weight polyisobutylene matrix was dissoluting in 8 h, the laetrile release amount was about 10%. When plaster of the high molecular weight polyisobutylene matrix was in this period, the release of laetrile was not detected. When hydrogel matrix was dosing for 8 h, the laetrile cumulative transmittance amount of microdialysis was (29.13±3.09)%; when the medium molecular weight of polyisobutene matrix plaster was in this period, the cumulative transmittance amount of microdialysis was 0. Conclusion Hydrogel matrix is conductive to the release of effective components and transdermal absorption, and is more suitable for being used as matrix in pediatric Qingre Xuanfei Plaster.

Keywords: pediatric Qingre Xuanfei Plaster; matrix; microdialysis; release rate; transdermal absorption; laetrile 小儿清热宣肺贴由苦杏仁、桃仁、栀子、红花等组成，贴于膻中及双侧肺俞，主要功效为清热宣肺、

基金项目：甘肃省高等学校科学研究项目（2012-7）

通讯作者：魏舒畅，E-mail：wshch006@ sina.com 清热解毒、活血通络、止咳化痰。方中君药苦杏仁和桃仁的主要有效成分是苦杏仁苷，具有镇咳平喘、抗

炎镇痛及调节免疫的药理作用[1-2]，故选用苦杏仁苷为小儿清热宣肺贴考察指标。目前苦杏仁苷透皮给药

制剂的相关研究主要采用离体扩散实验[3-4]，而在体

皮肤与离体皮肤存在差异，故离体扩散实验并不能揭示药物的真实透皮情况。作为一种生物活体采样技

术，微透析具有微创、在体、实时等特点[5-8]。本研究采用微透析技术，通过对水凝胶基质、中分子量聚异丁烯基质、高分子量聚异丁烯基质小儿清热宣肺贴中苦杏仁苷的累积溶出度和微透析累积透过率进行测定，考察不同基质对药物释放速度和透皮吸收的影响，为小儿清热宣肺贴优选出最适宜的基质。仪器、试药与动物

CMA402 微透析仪（瑞典CMA 公司），RC-型溶出度测试仪（天津富兰斯电子科贸有限公司），

Aglient-1206 高效液相色谱仪（Agilent Technologies），

FA2204B万分之一电子天平（上海越平科学仪器有限

公司），YP5002电子天平（上海越平科学仪器有限公司），超声波清洗机（宁波新其生物科技股份有限公

司），HP-01 型无油真空泵（长沙科怡仪器设备有限

公司），Advanced-I-062 艾柯实验室超纯水机（成都唐氏康宁科技发展有限公司，成都艾柯水处理设备有限公司等）。

苦杏仁苷对照品（中国食品药品检定研究院，质

量分数＞93.4%，批号 110820-201506），磷酸为分析纯，乙腈为色谱纯，甲醇为色谱纯。小儿清热宣肺凝胶基质（甘肃中医药大学中药制剂实验室）贴，中分子量聚异丁烯基质（数均分子量 4.5 万，广州启杰化工科技有限公司）贴，高分子聚异丁烯基质（数均分子量 7.5万，广州启杰化工科技有限公司）贴。

健康 SPF 级 SD 大鼠 22 只，雌雄各半，12周龄，

体质量（200±20）g，甘肃中医药大学实验动物中心提供，合格证号 SCXK（甘）2015-0005。室温（20±

2）℃、相对湿度（55±5）%、12 h明暗交替环境中适应性喂养1周后开始实验。

2 方法与结果

2.1 苦杏仁苷含量测定2.1.1 对照品溶液的制备取苦杏仁苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，定容至刻度，混匀，制得每1 mL 含 0.42 mg苦杏仁苷的对照品母液，取不同体积的对照品母液进行稀释，配制成每1 mL 含 4.2、8.4、16.8、33.6、50.4、

67.2 µg苦杏仁苷的对照品溶液。

2.1.2 色谱条件

采用 Waters XBridge 色谱柱（4.5 mm×250 mm，

5 µm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（8∶92），检测波长 207 nm，流速 1.0 mL/min，柱温 25 ℃，进样量

10 µL[9]。

2.1.3专属性考察取在体微透析空白透析液、苦杏仁苷对照品溶

液，按“2.1.2”项下色谱条件测定，结果透析液中其他物质不干扰苦杏仁苷的测定，表明本法专属性良好。色谱图见图1。

2.1.4探针的体外回收率试验将微透析探针浸入每1 mL 含 4.2、16.8、33.6、

50.4 µg 苦杏仁苷的生理盐水溶液中，水温维持在

37 ℃，以空白生理盐水溶液进行灌注，流速2 µL/min，每个浓度收集5份微透析样品。改换灌注液时，用待灌溶液平衡20 min。按“2.1.2”项下色谱条件测定，

按公式回收率（%）＝Cout÷Cin×100%计算增量法测定的苦杏仁苷回收率。

将微透析探针浸入不含苦杏仁苷的空白生理盐水溶液中，水温维持在37 ℃，分别以每1 mL 含 4.2、

16.8、33.6、50.4 µg苦杏仁苷的生理盐水溶液进行灌注，流速为 2 µL/min，每个浓度收集 5 份微透析样品。改换灌注液时，用待灌溶液平衡 20 min。按

“2.1.2”项下色谱条件测定，按公式回收率（%）＝

（Cin－Cout）÷Cin×100%计算减量法测定的苦杏仁苷回收率。

结果增量法回收率为（56.75±2.63）%，减量法

回收率为（49.25±3.31）%，表明灌注液的浓度对测定探针的体外回收率无影响，见图2。

2.1.5探针的在体回收率试验

将 6 只 SD 大鼠腹部脱毛，用 1%戊巴比妥钠溶液麻醉并固定于保温垫上，使其体温维持在 37 ℃，将微透析探针埋入大鼠腹部真皮层中，引导针抽回而微透析探针膜管留于大鼠皮下组织中，以生理盐水溶液进行灌注，流速为2 µL/min，透析灌流 1.5 h，以修复组织损伤。平衡后分别用每1 mL 含 4.2、16.8、33.6、

50.4 µg的苦杏仁苷生理盐水溶液为灌注液进行透析，每 1h 收集 1次透析样品，每个浓度收集6份。改换灌注液时，用待灌注溶液平衡 20 min。各样品按

“2.1.2”项下色谱条件测定，计算各浓度灌注液的在体回收率，结果见表 1。表明灌注液浓度对测定探针的在体回收率无影响。

2.2小儿清热宣肺提取物中苦杏仁苷的含量测定取小儿清热宣肺提取物粉末约0.12 g，平行 3次，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，超声处理（功率 250 W，频率 40 kHz）

30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，用微孔滤膜过滤。精密量取续滤液10 mL，置

25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得[9]。分别吸取不同样品的续滤液10 µL，按“2.1.2”项下色谱条件测定，结果苦杏仁苷含量分别为 5.842、5.676、

5.792 mg，每克提取物粉末中苦杏仁苷的平均含量为

48.083 mg/g。

2.3 不同基质贴剂累积溶出度的测定和释药稳定性的考察

取小儿清热宣肺贴（亲水性凝胶基质贴、中分子量聚异丁烯基质贴、高分子量聚异丁烯基质贴）除去防黏层，剪成直径6 cm，称定质量约为3g，按 2015 年版《中华人民共和国药典》（四部）附录溶出度测

[10]

定法第二法（桨法） ，溶出介质为 450 mL超纯水，转速 60 r/min，温度（32±0.5）℃，于 0.5、1、2、4、

8 h时取样5 mL（同时补液），水浴蒸干后，用甲醇定容至 10 mL，摇匀，用 0.22 µm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。分别吸取不同样品的供试品溶液 10 µL，按“2.1.2”项下色谱条件测定苦杏仁苷累积溶出量，计算成分累积溶出度，绘制累积溶出度曲线，结果见图 3。分别取中分子量聚异丁烯基质贴和凝胶基质贴各6份，重新制样，以测定中间点4 h

为考察点取样，按“2.1.2”项下色谱条件测定苦杏仁苷溶出量，考察基质释药稳定性，结果见图4。

2.4苦杏仁苷微透析累积透过率的测定

取 16 只 SD大鼠，雌雄各半，随机分为2 组，每组 8只。腹部脱毛，经皮分别予小儿清热宣肺中分子量聚异丁烯基质贴和凝胶基质贴，给药剂量为 0.5 贴（直径3 cm，质量约为 1.5 g）。按“2.1.5”项下手术过程埋植微透析探针，给药8 h，分别收集 2 组透析

液，按“2.1.2”项下色谱条件分别测定苦杏仁苷累积透过量，按照体内探针在体回收率的结果进行校正，求得苦杏仁苷的实际累积透过量（C＝C 透析液/在体回收率）。计算成分微透析累积透过率，结果见表2。

高分子量聚异丁烯基质贴在0.5～8 h未检测到苦杏仁苷释放，故未进行4 h稳定性考察和微透析实验。中分子量聚异丁烯基质贴在0.5～2 h苦杏仁苷累积溶出度不足2%，在 8 h时累积溶出度为10%；8 只 SD大鼠给药8h的透析液中未检测到苦杏仁苷，表明中分子量聚异丁烯基质贴释药速度和透皮吸收缓慢。

凝胶基质贴在0.5～2 h苦杏仁苷的累积溶出度为

76%，在 8 h时苦杏仁苷基本完全释放，表明其短时间内有效成分释放迅速；经过对4h释药稳定性的考

察，4h溶出度的RSD＝1.7%，表明凝胶基质贴有效

成分释放稳定；8只 SD大鼠给药8 h，苦杏仁苷累积

透过率为（29.13±3.09）%，表明凝胶基质贴透皮吸收良好。

讨论本试验所用小儿清热宣肺贴均由甘肃中医药大学中药制剂实验室制备，除基质不同外，所用药粉的种类及药粉在药贴中所占比例均相同。所采用的含量测定方法均为 2015 年版《中华人民共和国药典》所规定，故未进行方法学考察。

聚异丁烯基质是目前最易获得也是最普遍使用的贴膏基质。中分子量聚异丁烯基质较高分子量聚异丁烯基质链短，其基质致密性相对较弱，故释药速度相对应较快，但本研究果表明，即使中分子量聚异丁烯基质作为小儿清热宣肺贴这类需要迅速起效的贴剂基质仍然不太适合。

中分子量聚异丁烯基质释药速度缓慢的原因可能由于其为疏水性基质，遇水不膨胀，基质内药物不易溶解，故在贴剂表面药物透皮吸收后，基质内部药物不能及时内部向表面补充所致，而皮肤表面药物浓度不够可能是导致中分子量聚异丁烯基质贴剂透皮率实测不到的主要原因。

亲水性凝胶基质释药及透皮性能良好的原因可能由于其为水溶性聚合物和交联剂螯合固化而成型，

呈三维网络状结构[11]，遇水膨胀，相对于线型聚合物更易于药物释放。苦杏仁苷系水溶性成分，水凝胶基质遇汗液膨胀后，苦杏仁苷在基质中可很好溶解，从 而在基质内形成一个可扩散性药库，当贴剂表面药物透皮吸收后，基质内部药物可及时向皮肤表面扩散补充，有利于药物的透皮吸收。本试验对小儿清热宣肺凝胶基质贴中苦杏仁苷的释放及透皮情况的研究数据与上述推断一致。本研究结果也可为水溶性药物贴剂开发的适宜性基质选择提供有价值的参考。

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（收稿日期：2017-08-06）

（修回日期：2017-10-09；编辑：陈静）